DL对大鼠颈动静脉旁路血栓形成及小鼠出凝血时间的影响文献综述

 2022-12-26 04:12

实验背景:

血栓形成是指在一定条件下,血液有形成分在血管内形成栓子,造成血管部分或全部堵塞、相应部位血液供应障碍而形成的一系列综合病征,是多种脑血管疾病共同的病理过程。[1]随着社会的发展和人口的老龄化,血栓性疾病的发病率逐年增加。[2]目前,防治血栓性疾病的药物包括溶栓药物、抗血小板药物和抗凝剂,方法主要是降低血液粘度,然而使用此类药物会导致消化系统溃疡,造成诸如消化道出血、无症状性溃疡病等疾病的发生。[3]研究通过复制大鼠动静脉旁路血栓形成模型,考察DL-4的抗血栓形成作用,及其对小鼠血小板聚集和出、凝血的影响。

实验方法:

1.DL对大鼠颈动静脉旁路血栓形成实验分组、给药及模型制备

取SPF级雄性SD大鼠80只,体重180-220 g,按随机数字表法分为10组,每组8只。分别为DL-4高剂量组2.0mg/kg、中剂量组1.0mg/kg、低剂量组0.5mg/kg,非氘代DL-4高剂量组2.0mg/kg、中剂量组1.0mg/kg、低剂量组0.5mg/kg,阳性对照药氯吡格雷组7.5mg/kg;阳性对照药替卡格雷组9mg/kg,阳性对照药阿司匹林组30mg/kg,另设空白对照组(给以等容积的0.5% CMC-Na)。每天灌胃给药一次,给药容积为0.5 ml/100 g体重,连续给药5天。

末次给药后15min,用3%水合氯醛腹腔麻醉(1 ml/100 g体重),仰卧固定分离右颈总动脉及左颈外静脉。取内径为1.5 mm,长10 cm的聚乙烯管,内置一根长6 cm的丝线(预先称重),以肝素生理盐水溶液(50 U/ml)充满聚乙烯管。将聚乙烯管的一端插入左颈外静脉后,注入肝素(50 U/kg),另一端插入右颈总动脉开放血流15 min后中断血流并迅速取出丝线称重,总重减去原丝线重即为血栓湿重。丝线70℃烘干,取出称重,总重量减去丝线重即为血栓干重,并计算抑制率。

  1. DL对小鼠出凝血时间影响实验分组、给药及测定

取SPF级ICR小鼠100只,雌雄各半,体重18-22g,按体重随机分为10组,每组10只,分别为DL-4高剂量组4.0mg/kg、中剂量组2.0mg/kg、低剂量组1.0mg/kg,非氘代DL-4高剂量组4.0mg/kg、中剂量组2.0mg/kg、低剂量组1.0mg/kg,阳性对照药氯吡格雷组15mg/kg;阳性对照药替卡格雷组18mg/kg,阳性对照药阿司匹林组60mg/kg,另设空白对照组(给以等容积的0.5% CMC-Na)。每天灌胃给药一次,连续给药5天,给药容积为0.2ml/10g体重。

2.1 出血时间测定

末次给药后15min,将其尾部垂直,用毫米尺测量,并在距尾尖5mm处作标记,然后用手术刀片在鼠尾标记处垂直切断,待血液自行溢出开始计时,每隔30s用滤纸吸去血滴1次,直至血液自然停止(滤纸吸时无血为止),即为出血时间,用秒表记录出血时间。

2.2 凝血时间测定

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