1、背景介绍：Ⅱ型糖尿病作为目前人群中最为主要的糖尿病类型,其大血管并发症尤其是以动脉粥样硬化为主要表现的心脑血管系统疾病是导致患者高致残率、高致死率的主要原因之一。
前列腺素E1(Prostaglandin E1, PGE1)是一种具有广泛生物活性的内源性物质,是多不饱和脂肪酸二高gamma;-亚油脂酸(DGLA)的氧化产物。
PGE1具有舒张血管、抑制血小板聚集、促进血管新生和降低血液粘度的作用。
临床上广泛用于冠状动脉粥样硬化性心脏病、心力衰竭、脑梗死、肺心病、肺动脉高压、糖尿病并发症、肾病等的治疗。
现在越来越多的研究开始探索PGE1的抗炎抗氧化和血管内皮保护作用。
PGE1可以保护人视网膜色素上皮细胞避免氧化损伤,抑制甲氨蝶呤处理大鼠肠粘膜上皮细胞产生活性氧(ROS),降低外周血管疾病、外周动脉硬化症和肝缺血再灌注损伤患者血液循环中的可溶性黏附分子。
2、研究的问题：PGE1对血管平滑肌细胞分化的改善作用3、研究方法：Western blot：1）试剂制备：储备液：PMSF、裂解液、Tris-HCL(pH6.8和8.8)、10％SDS、10％APS、5X上样缓冲液。
工作夜：电泳缓冲液、专膜缓冲液、10*TBS、1*TBS、考马斯亮蓝缓冲液、脱色液、封闭液、抗体。
2）蛋白样品制备： ①单层贴壁细胞的总蛋白提取：a、弃去培养液，每瓶细胞加1-2ml 4℃预冷的PBS，平放轻轻摇动1min洗涤细胞，然后弃去上清。
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