重组尿酸酶的分离纯化研究文献综述

 2023-01-15 04:01

开题报告内容:

研究背景:

尿酸酶[EC1.7.3.3]是嘌呤代谢过程中的一种酶,能分解嘌呤代谢最终产物尿酸,生成水溶性更强,更易分解的尿囊素。自然界中大多数生物体在嘌呤代谢中都产生尿酸,许多微生物能够直接将尿酸分解而排出体外,但是鸟类、爬行类和包括人类在内的灵长类动物由于体内缺乏尿酸酶,这导致人类以尿酸作为嘌呤代谢的终产物。尿酸主要通过肾脏排泄,血清尿酸水平是肾脏功能监测的有效指标。当人血液中尿酸浓度高于其溶解度(高尿酸血症)时可引起尿酸性肾病和痛风性关节炎。尿酸酶可降低痛风病人体内的尿酸水平,消除痛风病人痛风性关节炎、痛风石沉积、尿酸肾结石的形成等症状。

研究目的和意义:

我国是一个人口大国,随着生活水平的不断提高,高尿酸引起的一系列疾病的患者数量急剧增加,该类疾病己成为危害人类健康的重要疾病。2008年我国高尿酸血症患者占总人口的13.19%,而痛风的患病率高达1.14%。别嘌呤醇是最常见的痛风治疗药物,但患者依从性较差,不良反应多见,而且在一直接受别嘌呤醇治疗的患者中,有一大部分患者并没有达到控制血液尿酸的目标值(lt;6.omggt;因此,尿酸酶在对于高尿酸引起的尿酸性肾病和痛风的治疗方面有着不可取代的重要地位。近期由FDA批准上市的PEG修饰类猪源尿酸酶(Pegloticase)显示出了快速消融痛风石的独特功效(难治性痛风石性痛风是该类疾病中破坏性最大、患者痛苦最高的疾病)。尽管该药具有较高的免疫原性,并且只能进行静脉推注,但国外Pegloticase的销售价格为每剂量2300美元,每周期(半年)治疗费用为2.76万美元。国内目前无任何尿酸酶类药物上市,其他厂家研制的已进入临床试验阶段的尿酸酶类药物为未修饰微生物来源尿酸酶。因此,尿酸酶类的药物在我国乃至世界上有着很大的空间。

要想研制成功一款好药,各个环节都必须牢牢抓紧并且紧密配合。因此对于重组尿酸酶的分离与纯化研究也是必不可少的。我们希望通过设计合理高效的分离纯化工艺,在实验室前期构建的重组尿酸酶基因工程菌的基础上,分离纯化得到纯度达到90%的尿酸酶。

实验内容:

1.材料:

1.1菌株:本实验室前期构建的重组尿酸酶基因工程菌。

1.2试剂:氨苄青霉素、IPTG、丙烯酰胺、过硫酸铵(AP)、SDS、TEMED、NaCl、甘油、beta;-巯基乙醇、QSepharoseF.F阴离子纯化填料。

剩余内容已隐藏,您需要先支付 10元 才能查看该篇文章全部内容!立即支付

以上是毕业论文文献综述,课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。