开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
研究背景
如今肿瘤已成为威胁人类健康的一大恶性疾病，肿瘤的早期诊断和检测对于提高肿瘤的治愈率和患者的生存质量具有十分重要的意义。目前常见的检测肿瘤的手段主要有核磁共振造影术(MRI), 计算机X-射线断层扫描，放射性核素成像如正电子发射断层摄影术(PET)和单光子发射计算机断层摄影术(SPECT)，光学成像等。如今，如何进行无损安全诊断是研究的一个热点。
核酸适配体( aptamer) 是一类能特异性地与各类生物靶标以较高亲和力相结合的单链DNA 或RNA。其作用原理和抗体类似，通过核酸自身形成的三维空间结构识别各种不同的分子，如氨基酸、多肽、金属离子、蛋白质、核酸、病毒及细胞等，然相比抗体又有很多独特的优势，例如靶分子广、具有高特异性高亲和力、免疫原性低、体外容易修饰、价格低廉等[8]。核酸适配体可以通过指数级富集的配体进化技术( SELEX) 获得。SELEX 技术是由Tuerk和Ellington于1990年分别独立建立[1,2]。大多数核酸适配体与靶分子结合后对靶分子有抑制作用。核酸适配体可广泛用于抗凝血、抗病毒、抗肿瘤增殖等方面。特异针对人VEGF165的核酸适配子和的用于治疗湿性老年黄斑变性的核酸适配子药物Macugen已分别被美国FDA批准上市[3,4]。在诊断方面，已有荧光标记的抗人凝血素核酸配基用于体内诊断的报道。作为示踪剂．寡核苷酸适配子具备了作为导向剂所需的所有特性，其分子可结合放射性核素、毒素等并递送到靶组织，同时还具有直接抑制靶蛋白的功能，是非常有潜力的体内显像和治疗药物[9]。
MUCl是粘蛋白家族十一个成员之一，其基因定位于染色体lq21，cDNA长1821bp，含有7个外显子。MUC1 在正常上皮组织中起重要保护作用,在肿瘤细胞中具有促使肿瘤细胞对正常细胞的粘附作用和减少肿瘤细胞间的粘附力,并且通过位阻现象使肿瘤细胞逃避免疫识别等作用。在上皮肿瘤细胞中，MUC1高表达，而正常细胞中低表达，据此为标靶可应用于肿瘤的检测和核酸适配体的治疗[6,7]。
研究目的
本课题基于靶向分子探针的原理，以肿瘤细胞表面高表达的粘蛋白1（MUC1）为靶点，以核酸适配体为导向，偶联染料构建了以核酸适配体（DNA）为基础的分子探针。另用聚乙二醇做为偶联桥梁，对探针进行了结构修饰，建成核酸适配体-聚乙二醇偶联探针，使探针的性能得到优化。并将这一系列探针用于MUC1高表达肿瘤的体外诊断和检测，为将MUC1适配体应用于肿瘤活体诊断打下基础。
实验步骤
本课题研究工作主要分为以下三个部分：第一部分为核酸适配体-RhB探针和DNA-PEG- RhB探针的制备纯化及相应的表征。第二部分为核酸适配体-RhB探针和DNA-PEG- RhB的体外细胞毒性实验。第三部分为探针在细胞中的摄取实验，比较不同肿瘤细胞中两种探针的摄取量。具体步骤如下：
DNA-RhB探针的制备及分离纯化
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