开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一.研究问题:
肿瘤抗原是指细胞恶性变过程中出现的新抗原物质的总称。细胞恶性变过程中由于基因突变或正常静止基因的激活都可以产生新的蛋白分子。这些蛋白质在细胞内降解后,某些降解的短肽可与MHCⅠ类分子在内质网中结合,并共表达于细胞表面,成为被CD8 CTL识别和杀伤的肿瘤特异抗原。此外,某些细胞在恶性变后,可使正常情况下处于隐敝状态的抗原决定簇暴露出来,成为肿瘤相关抗原,可被B细胞识别产生抗肿瘤抗体。
流式细胞技术(FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物。
本实验通过不同类型肿瘤抗原(冻融抗原,抗原多肽,蛋白抗原,Dribble抗原,TAFF抗原)皮下注射到小鼠体内,在不同的时间点取脾脏流式分析OVAI类肽-MHCI分子的提呈情况得到不同肿瘤抗原在体内提呈的数据,同上,除去MoDC和胞株,在不同时间点检测MHCI-OVA肽的水平。
二.研究手段:
2.1 不同类型肿瘤抗原
准备不同类型肿瘤抗原:
1.冻融抗原;2.抗原多肽;3.蛋白抗原;4.Dribble抗原;5.TAFF抗原
2.2将抗原注入小鼠体内
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