文献综述
文 献 综 述1 甲酸脱氢酶1.1甲酸脱氢酶的概述甲酸脱氢酶是一种氧化还原型酶,简称FDH,用于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的再生。
甲酸脱氢酶具有氧化性质,将甲酸盐氧化成二氧化碳同时使NAD(P) 还原成NADH。
1.2甲酸脱氢酶的研究开发甲酸脱氢酶属于D-2-羟基酸脱氢酶类,能催化甲酸脱氢酶氧化成二氧化碳,同时能将氧化型辅酶还原成还原型辅酶I,在NADH的再生中起重要作用[1]。
甲酸脱氢酶广泛存在于甲基营养型微生物中,为了获得具有高活性的甲酸脱氢酶,研究人员对甲酸脱氢酶进行了基因的定点突变、重组蛋白表达、PCR法扩增甲酸脱氢酶基因技术[2]。
经研究发现以博伊丁假丝酵母的甲酸脱氢酶突变体为亲本的进化突变获得了一个比之前活性高达4倍的酶[1];以酿酒酵母甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌中表达重组获得甲酸脱氢酶的酶学性质[2]。
因此经过之前的研究,甲酸脱氢酶在辅酶NADH再生方面的应用为未来这方面的研究奠定了基础。
1.3固定化甲酸脱氢酶的应用现状1.3.1国内外对甲酸脱氢酶研究现状近年来,甲酸脱氢酶在辅酶再生中的应用已成为辅酶酶法再生研究领域的热点,并应用于纺织业,化工等多方面的工业生产。
甲酸脱氢酶还具有很多优势:(1) FDH容易得到,且适宜的pH范围宽,易于实现再生反应与合成反应的有效耦合;(2)甲酸是最廉价的氢源之一;(3)甲酸在FDH作用下转化为CO2,可直接从产物中分离出去,使反应接近于不可逆过程;(4)甲酸的存在并不会影响体系中另一氧化还原酶的活性。
目前研究发现甲酸脱氢酶最好的保持酶活性的方法是采用固定化技术,固定化FDH在4摄氏度贮存两周后活性仅下降 4%,因此目前在生物技术应用中得到广泛的认可[3]。
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