开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、课题背景
纳米金粒子(AuNP)是指直径在0. 5 ~ 250 nm 的金超微粒子,具有量子效应、小尺寸效应和极大的比表面积等独特的理化性质,而且细胞毒性低,与各种不同的配体有相对较高的相容性,很容易进入细胞内,可以实现对生物大分子的精确定位,因而可作为药物传递载体在生物、医学等领域广泛应用。
细菌素(Bacteriocin)是某些细菌在代谢过程中通过核糖体合成机制产生的一类对它种细菌尤其是与产生菌亲缘关系密切的细菌种有抑杀作用的肽类或蛋白质类物质。与其他化学防腐剂相比,细菌素具有安全、无毒、无残留、性能稳定等优势,有助于降低抗生素的使用量,减少环境耐药性菌株的产生。但是大多数商业化应用的细菌素,如乳酸链球菌素(Nisin),对革兰氏阳性菌(G )有明显的抑制作用,而对革兰氏阴性菌(G-)作用不显著,其主要原因是细菌素不能穿透细胞壁或细胞膜,尤其是G-腐败菌,从而不能进入细胞内部发挥抑菌作用。目前使用的一些方法如自组装、微胶囊包埋等处理细菌素,对细菌素本身的抑菌谱拓宽并没有显著作用。因此需要寻找新的更有效的途径扩展细菌素的抑菌谱。
如果利用纳米金属易被细胞摄入的特性,将AuNP与细菌素混合后,-AuNP作为先驱因子,与细菌膜表面蛋白接触相互作用, 增强细胞膜的通透性,协助细菌素破坏细胞壁和细胞膜的屏障,弥补细菌素不能穿透细胞壁或细胞膜的缺陷,为细菌素进入细胞内部打开通道,发挥抑菌作用,也许是解决食品工业防腐问题的有效途径。
本文采用一株从腐败的水产食品中分离得到的普罗维斯登菌作为靶细菌,优化Turkevich法制备纳米金的条件参数,并与一种前期研究中分离鉴定的新型细菌素结合使用,研究两者协同作用对水产品中腐败菌的抑制效果。
- 要解决的问题
(1)通过优化AuNP制备条件,制备粒径在20nm以下、分散度好的纳米金,增强纳米金溶胶的稳定性。
(2)研究纳米金与细菌素的协同作用,检测对水产品中腐败菌的抑菌活性。
- 可行性分析
(1)项目选题和技术方案可行。纳米技术和细菌素的研究比较多,但以往的研究一般都是独立开展,用于生物、医学药物领域较多 。在食品领域多数采用纳米金属氧化物,而纳米金研究较少,且其不同于其他纳米金属粒子的离子效应,本身并不具有抑菌作用。理论上本课题可以实施,且申请人前期以熟练掌握和应用个小技术,该课题所有技术手段能确保可行。
(2) 研究平台先进。本课题依托江苏省农业科学院中心实验室平台,以及食品安全与检测中心公共实验平台和农产品加工研究所公共实验平台,具有先进的仪器设备和良好的研究条件,为本课题的顺利实施提供了完善的设备支持。
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