开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 研究背景
益生菌是通过定殖在人体内,改变宿主某一部位菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物。其通过调节宿主黏膜与系统免疫功能或调节肠道内菌群平衡,促进营养吸收,从而产生有利于宿主健康的单微生物或组成明确的混合微生物[1]。
大量研究表明, 食用益生菌对人体有益。目前研究证实, 口服益生菌有助于治疗或缓解胃肠炎、抗生素相关性腹泻、旅行性腹泻、便秘及肠道感染, 增强消化道功能, 促进肠道营养吸收, 益生菌还能分解乳糖和葡萄糖, 缓解乳糖不耐症, 这些有机酸的产生可改善肠道内碱性环境, 抑制有害微生物在宿主肠道中定植, 对肠易激综合征、炎症性肠炎及结肠癌等肠道相关性疾病也具有良好的预防和治疗作用[2]。临床医学研究表明, 益生菌可通过迷走神经、神经免疫系统、神经递质、微生物代谢产物等途径调节肠道菌群的组成, 从而缓解神经性疾病, 对自闭症谱系障碍、阿尔兹海默症、帕金森病、抑郁症和多发性硬化等神经系统疾病具有良好的防治作用[3]。此外, 相关研究发现, 益生菌具有免疫调节作用, 可以缓解过敏、抑制消化道肿瘤。实验发现, 益生菌如植物乳杆菌、干酪乳杆菌、双歧杆菌等都具有防治心血管疾病, 降低血压、血脂、血糖的功效, 在防治肥胖、治疗糖尿病等方面也发挥重大的作用[4]。
益生菌在功能性食品中应用的焦点问题表现在益生菌的货架期 (20-25℃常温下) 和加工过程中活力的损失以及能否高效地到达肠道而不被胃酸过多杀死等方面。因此在使用菌种时, 须考虑相关关键参数有水分活度、氧含量、新陈代谢的碳水化合物、pH值、温度、机械压力等。同时在筛选菌种时, 亦注重菌株本身的基本特性。此外, 微胶囊化技术的进展对益生菌种的更广泛运用有积极推动意义[5]。
从生产应用上看灭活益生菌较益生菌活菌主要具有以下几个方面的优势: 1)安全性高。Wagner等[6]研究表明,益生菌活菌菌体的突变、非正常部位转移以及抗药性基因转移都可能会增加致病菌的危险尤其对-些免疫力缺陷的病人而言,服用益生菌活菌很容易引起病理反应[7]。相比较而言,灭活益生菌具有更高的安全性。2)用量易控制。Shah[8]研究报道使用益生菌活菌时，要获得预期的效果其活菌数量必须达到一定水平,最低水平为每次摄取1x109CFU,以提供足够的活细胞在宿主肠道中定植[9],但过量添加又会引起-些不良反应;而灭活益生菌少量或适量添加均对机体有益，过量添加对机体影响也较小。3)稳定性高。灭活益生菌不需要维持-定的活菌数星,因此在运输、保存等方面较益生菌活菌更为容易,质量和稳定性也较高。4)可与其他添加剂合用。灭活益生菌可与其他添加剂合用，如抗生素、丁酸盐、活菌制剂等。而益生菌活菌在与其他添加剂使用时易产生敏感反应。5)抗逆性强。唾液、胃酸、胆汁、各种消化酶等均会影响益生菌活菌的使用效果,益生菌活菌在到达肠道的过程中,非芽孢杆菌类容易失活;而灭活益生菌是死菌,不受环境变化的影响,故能耐高温、胃酸、胆汁、消化酶、碱等具有极强的抗逆性。6)不会导致噬菌体感染。由于灭活益生菌是死菌,不需繁殖，虽然可被噬菌体吸附,但不会被感染破坏[10]。
本研究利用鼠李糖乳杆菌TR08，制备灭活的灭活益生菌，一方面利用质谱技术对其所含主要成分进行定性定量检测；另一方面通过对健康小鼠使用DSS诱导后建立的小鼠结肠炎为模型，探究灭活罗伊氏乳杆菌TR01在此模型下的保护作用及潜在机制，主要包括结肠长度、疾病活动指数（DAI）、结肠病例分析、生化指标分析、促炎因子水平分析、结肠紧密连接蛋白表达分析等方面。通过这些研究明确灭活罗伊氏乳杆菌TR01的功能作用，指导转化开发。
二． 拟解决问题
本研究旨在研究灭活鼠李糖乳杆菌TR08的功能作用，利用质谱技术对灭活鼠李糖乳杆菌TR08中所含成分进行定性分析。使用DSS诱导后建立结肠炎小鼠模型，并对结肠炎小鼠使用灭活鼠李糖乳杆菌TR08进行保护干预，以验证灭活鼠李糖乳杆菌TR08对DSS诱导的结肠炎小鼠炎症因子、病理组织学、结肠紧密连接蛋白表达等方面的影响。
三．主要研究手段
3.1活性益生菌的热灭活：
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