开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
拟研究及解决的问题:
熟悉并了解血小板活化的抑制作用的机制和研究进展。
学习并熟练掌握大鼠给药,颈部手术及取血的方法。
掌握大鼠血体外血小板TXA2、PGI2、PGH2和大鼠血小板胞浆[Ca2 ]含量的测定方法,掌握血小板聚集抑制率测算方法。
根据新药临床前研究指导原则,研究受试药物体内外给药对大鼠血小板聚集的影响,为临床应用提供试验依据。
研究手段:
1. JLX001对ADP及U46619诱导大鼠体外血小板聚集的抑制作用
分组及给药浓度为奥扎格雷组(10mu;M)、依达拉奉组(10mu;M)、银杏二萜内酯葡胺组(25mg/L)、5组JLX001(终浓度分别为:100mu;M、30mu;M、10mu;M、3mu;M、1mu;M)。另设空白对照组(给予0.9%的氯化钠注射液)。
SPF级SD大鼠,180-220g,雄性,采用颈总动脉插管的方法取血,使血液与3.8%柠檬酸三钠容积之比为9:1。制备的抗凝血液混匀后离心制备PRP和PPP。先取300mu;l PPP进行定标。然后取240mu;l PRP加入测试杯中,加入30mu;l不同浓度的药液,在37℃预温槽中预热3min,放入测试孔后,按“开始”键时立即加入ADP 30mu;l (ADP终浓度10mu;Mu;),以测定最大聚集率。以上述方式再次测定加入U46619 30mu;l (U46619终浓度3mu;Mu;)时血小板的最大聚集率。
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