ALK/ROS1基因融合细胞稳定株的筛选及验证文献综述

 2022-12-30 04:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

拟解决问题:

ALK及ROS1是肺癌中最为常见的融合基因,其检测对于肺癌的靶向治疗至关重要。部分常见融合亚型缺乏可用的商业化细胞系,而临床样本又往往难以长期稳定获取足量的样本量。本研究旨在利用已构建的ALK, ROS1真核表达质粒载体,构建ALK,ROS1融合表达细胞稳定株,以用于ALK及ROS1融合分子水平的实验室检测质量控制或产品开发。

研究方法:

1)转染预实验:包括质粒转染预实验及验证,目的细胞系选择,G418在目的细胞系中致死浓度确定。

2)细胞转染正式实验及G418筛选

3)单克隆选取及扩增

4)单克隆RNA提取及基因融合表达qPCR鉴定

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