荧光标记适配体组装的共价有机框架材料用于microRNA的检测文献综述

 2022-12-03 07:12

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

【选题目的】

MicroRNAs (miRNAs) ,长约18~25个碱基,在基因表达调控中发挥着关键作用,多种癌症或疾病的发展与某些miRNAs的异常表达密切相关,是分子生物学中鉴定生物学、生理学和病理学等过程的生物标志物之一。因此,特定miRNAs的灵敏检测对于进一步了解miRNAs的功能以及临床疾病诊断具有重要意义。由于许多重要的miRNAs在生物样品中的丰度非常低,通常需要一些核酸扩增技术来实现miRNAs检测的高灵敏度。这些基于酶的扩增测定需要相对干净的样品进行miRNAs检测,这极大地限制了它们在复杂生物样品中的应用,特别是在活细胞中miRNAs的原位分析。

共价有机框架材料(Covalent Organic Frameworks,COFs),指由轻原子(氢、硼、碳、氮等)通过共价键连接形成的具有二维拓扑结构的晶体材料,其自具孔且孔径均一,因此也被称为“有机沸石”。它的灵感来自于有机金属材料(MOFs)但是又区别于MOFs,通过在单体或者COFs聚合物上引入官能基团,可以赋予COFs材料许多独特性能,使其在吸附、催化、手性拆分等方向上极具应用潜力。与无机多孔材料相比,具有多样化、较好的热稳定性和化学稳定性、低密度等特性。

因此,共价有机框架材料的性质具有考察意义,其在核酸检测中也显现出巨大潜力,是具有吸引力的方法之一。

【研究内容及手段】

利用与荧光基团FAM和附加链ssDNA‑1rsquo;标记的MiR-21适配体P1、HEX附加链ssDNA‑1rsquo;标记的MiR-155适配体P2、TET附加链ssDNA‑1rsquo;标记的MiR-1246适配体P3,Texas Red标记的P1、SYBR GreenⅠ标记的P1与富含磺酸盐基团的磁性MON复合材料(MMON-SO3H@SO3Na)结合,使用荧光分光光度计进行性质的考察。通过对实验的优化,寻找适合的检测mirco-21的条件。通过荧光猝灭技术对不同浓度MircoRNAs实现检测。研究过程中用到BSA124S224S万分之一电子分析天平,Mini-15K高速离心机,RF-6000 荧光分光光度计,磁铁等。

【成果形式】

荧光强度曲线图等。

【工作进度】

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