课题名称 利用CRISPR/Cas9技术制备TCR敲除的小鼠CAR-T细胞 课题性质 基础研究radic;应用课题 设计型 调研综述 理论研究开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字） 研究目的：本次课题拟根据小鼠TCR基因编码序列设计向导RNAs（single guide RNA，sg RNA），制备相应质粒，然后将表达sgRNA和cas9蛋白的质粒经体外转录制备sgRNA-mRNA及cas9-mRNA。
将sgRNA及cas9-mRNA经电转同时导入小鼠CAR-T细胞中，制备TCR敲除的小鼠CAR-T细胞。
经流式细胞术检测TCR敲除效果。
掌握TCR基因序列的真核质粒的设计、构建及真核细胞的导入鉴定，同时熟悉流式细胞术在细胞鉴定中的应用。
研究背景：CAR-T疗法就是嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，英文全称Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy。
这是一种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法。
T细胞也叫T淋巴细胞，是人体白细胞的一种，来源于骨髓造血干细胞，在胸腺中成熟，然后移居到人体血液、淋巴和周围组织器官，发挥免疫功能。
其作用相当于人体内的'战士'，能够抵御和消灭'敌人'如感染、肿瘤、外来异物等。
我们可以通过基因工程技术，将T细胞激活，并装上定位导航装置CAR(肿瘤嵌合抗原受体)。
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