毛细管电泳测量某重组蛋白特性文献综述

 2023-02-13 10:02

一、选题原因

随着时代的发展,重组蛋白药物也得到了不断地开发,重组蛋白药物具有特异性强、毒性低、副作用小、生物功能明确等优点,全球至少3746重组蛋白药物已经进入了研发,现今,大量的重组蛋白药物处于临床和研发状态,所以对于重组蛋白的检测方法也变得更加重要起来,而毛细管电泳就是其中一个重要的方法。毛细管电泳是应用高电压在散热效率很高的毛细管内进行的电泳。其原理为溶质在单位电场下的电泳速度称为电淌度,电泳淌度与带电粒子、电荷数量、质点的大小相关,所以不同的粒子有不同的电泳淌度。电渗是一种液体相对于带电的管壁移动的现象。由于离子是溶剂化的,当扩散的离子在电场中发生迁移时,将携带溶剂一起移动,形成电渗流,单位电位梯度的电渗速度称为电渗淌度,在毛细管电泳中,同时存在着电泳流和电渗流,在不考虑相互作用的前提下,粒子在毛细管电泳中的运动速度应是电泳淌度和电渗淌度的矢量和。当把试样从正极端注入毛细管内时,正离子的电泳速度和电渗流的速度方向相同,故最先流出;中性粒子受电场力作用为零作用为零,在电渗流作用下向负极迁移;而阴离子的电泳方向和电渗流方向相反,但是电渗流速度一般大于电泳速度,所以最终也能从负极流出。于是,毛细管电泳便具有操作简单、分离效率高、样品用量少、运行成本低等特点,而与传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳相比,毛细管电泳能够进行更加微量的蛋白质分析,而且能更加高效的分离蛋白质,所以毛细管电泳是一种优秀的检验分析方法。同时,毛细管电泳在食品和中医药等方面都有广泛的应用,所以,我们进行毛细管电泳在重组蛋白中应用的研究。

二、课题目的和内容

而我这次研究的题目便是毛细管电泳在重组蛋白分析中的应用。我要熟悉毛细管电泳的运行方式并且通过毛细管电泳了解重组蛋白的特性。对于毛细管电泳如何使用要熟悉。毛细管电泳有专门的毛细管电泳仪,其包括高压电源、毛细管、正负电极、连接毛细管和电源电极的两端的电解液槽(两个)及其温度控制系统、检测器、数据处理系统。仪器运作时,两个电解液槽中充入相同背景缓冲液,毛细管柱两端分别插入其中,待测组分从毛细管的正极端导入,高压泵作为驱动力附加在毛细管两端后,带电粒子在电场作用下电泳运动,不同的粒子迁移速度不同,最终以不同的速度到达检测器被检出,得到按时间分布的电泳图谱。我们需要熟悉电泳仪,并能够熟练的使用电泳仪,这次研究中,我们通过进行重组蛋白的毛细管电泳,对于重组蛋白的纯度进行测定,我们能获得毛细管电泳的优点,并通过多次的毛细管电泳我们能够取得毛细管电泳检测重组蛋白的方法和固定模式。在这个过程中,我们需要对各种不同的毛细管电泳有所了解,在进行实验时,我们要了解不同毛细管电泳的做法以及其中的不同,并发现各种方法各自的优点,以保证更好的对重组蛋白的纯度进行测定。

三、待解决问题

本次研究,同样有问题需要我们去解决,首先,我对于毛细管电泳不熟悉,在进行毛细管电泳时,有可能 会出现人为失误,我需要尽快保证在毛细管电泳过程不出错。其次,对于毛细管电泳的结果,我缺乏分析经验,在实际操作中可能会出现效率低下的情况,对于结果分析的学习要加强。最后,毛细管电泳的种类多种多样,对于掌握各种方法而不混淆也是一个很大的挑战。

文献综述

毛细管电泳经过了很长时间的研究,我们已经对其有了一定的了解,毛细管电泳在很多时候都是比其他常规方法具有优势,而且应用广泛,对于蛋白类的检测运用较多。同时,毛细管电泳有很多不同的类别,每一种都有其独特的特点。毛细管电泳包括普通毛细管电泳、高效毛细管电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电聚焦电泳、胶束毛细管电泳、毛细管区带电泳、毛细管等速电泳以及毛细管电色谱。之后,我们就来看一下毛细管电泳的具体应用。

一、在食品安全方面的应用

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