- 课题背景
根据国家癌症学会发布的2020年度癌症统计数据表明，全世界患癌的人数在迅速增长，亚洲作为癌症的重灾区，其情况更为糟糕。目前医学对癌症的作用可分为以下三点：一是，查找外在的致癌因素预防癌症的出现；二是，定期筛查，早发现早治疗；三是，通过化疗，药物等治疗手段减轻患者的痛苦，延长寿命。目前对于癌症晚期，医学上也是束手无策。因此，保持一个良好的生活习惯，定期筛查是最好的防癌措施。
近年来，对肿瘤标志物的检测成为了肿瘤定期筛查的关键方法。肿瘤标志物从本质上是一类如激素、蛋白质和癌基因等反映肿瘤的存在与发展的物质。它多存在于患者的血液、体液、肿瘤组织和代谢物中，可以用免疫学等方式进行检测。准确的实现对肿瘤标志物的检测可以对肿瘤的早期诊断、恶化情况及恢复状况提供重要的判断依据。常用的肿瘤标志物检测方法有酶联免疫吸附测定、荧光免疫分析和生物传感器技术检测等。这些方法虽说都可实现对肿瘤标志物定量或半定量的检测，但都需要专业的设备和操作，成本高，无法实现现场检测。因此，研发一种操作简单、快速、成本低的体外检测方法非常有必要。
免疫层析纸条检测技术，具有快速检测、成本低廉、无需大型仪器设备和用户自主操作等优点，已成为POCT领域中最常用的疾病体外检测方法。胶体金是目前免疫层析方法中最经典且应用最为广泛的标记物，因为其合成简单、价格低廉、容易与蛋白结合且不破坏其生物活性、结果可用肉眼判读等优点，在生物医学诊断领域上得到广泛应用。
基于此，将胶体金免疫层析技术运用到肿瘤标志物的检测，即可实现对肿瘤标志物的快速体外检测。该研究的目的就是构建一种基于胶体金的肿瘤标志物体外检测方法。
- 要解决的问题
- 胶体金的质量表征及适宜的粒径。
- 选择适宜的方法提高胶体金试纸条的灵敏度。
- 评价胶体金免疫层析纸条的稳定性和抗干扰能力。
- 评价胶体金免疫层析纸条的特异性，避免多种肿瘤标志物发生信号干扰。
- 可行性分析
随着近年来纳米材料和体外检测方法的迅速发展，胶体金免疫层析技术已经被广泛应用于医学诊断、环境检测和食品安全检测等领域。在医学诊断上，早早孕试纸、三聚氰胺试纸等都表明，该项技术已比较成熟。此外，为了解决传统胶体金灵敏度低的问题，科研工作者也在致力于改进胶体金材料，以达到更好的检测效果。对于肿瘤标志物的检测，目前已有文献报道，可用胶体金试纸进行单一检测某种肿瘤标志物或者联合检测几种肿瘤标志物。例如，王玉金等采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金，标记抗CEA单克隆抗体4A3，然后将单克隆抗体3B5划线包被于NC膜上，制成免疫层析检测试纸条。通过该检测方法实现了对637份血清标本中肿瘤标志物的检测。从以上可知，胶体金免疫层析用于肿瘤标志物的检测技术可行，理论依据充分。
此外，层析试纸条在使用时简单易行，可以不需传统的实验室设备仪器和专业操作培训等。并且它成本低廉，安全可靠，不使用大量的有机试剂。相较于其他检测方法，如酶联免疫吸附测定，更方便和适合大众使用，且在肿瘤体外检测的市场上易于推广。
- 研究方法和内容
实验材料：
牛血清蛋白（BSA）和山羊抗鼠IgG抗体；
肿瘤标志物配对抗体及其相应标准品：
多份待测肿瘤标志物血清样本；
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