开题报告内容:
一、课题背景
随着当今社会工业化的飞速发展和群众生活水平的不断提高,空气污染日渐严重的同时各种精加工的高糖高脂食品大量进入人们的生活。由于部分人群同受污染空气的持续接触以及长期不健康的饮食结构习惯,其体内的自由基水平与血糖水平普遍容易有上升的趋势[[1]]。自由基及其诱导的氧化反应是导致生物衰老和某些疾病的重要因素,它与炎症、肿瘤、心血管等疾病的发生有关,适当补充抗氧化剂或自由基清除剂可以有效地预防或抑制这些疾病的发生[[2]]。糖尿病是由于人体对碳水化合物、蛋白质和脂肪代谢出现障碍性所导致,其发病率高,危害性较大。研究发现,位于小肠粘膜细胞刷状缘内的alpha;—葡萄糖苷酶,可以促进诱导食物中的碳水化合物分解成单糖,经小肠上皮细胞吸收后进入血循环,引发餐后血糖升高[[3]]。而部分植物中的活性物质可竞争性地与alpha;—葡萄糖苷酶结合,抑制其活性,从而减慢糖类水解产生葡萄糖的速度并延缓葡萄糖的吸收。
目前,由机体组织细胞异常氧化而导致的疾病以及糖尿病的发病率正在逐步提高,已上市的化学药物长期服用后大多具有各种不良反应。伴随中医药理论的发展,人们保健意识的提高以及对化学药物毒副作用的担忧,回归自然已成为民众对医疗保健的迫切期望,传统的药膳逐渐变成人们保健的首选。因此,开发以药食同源的中草药植物为原料具有抗氧化与降血糖活性且天然绿色无毒的药品或者保健品越来越受到人们的关注与青睐[[4]]。随着现代分析仪器技术的蓬勃发展,研究者们逐步发现了传统中药材中的化学活性成分种类,揭开了其药理作用的神秘面纱。
桃金娘科植物丁香的干燥花蕾是典型的药食两用材料,其化学成分十分复杂,含量较高且有一定药用价值的主要有挥发油(丁香酚)、总黄酮、有机酸以及蛋白质等成分[[5]]。多酚和黄酮类成分通常有较好的抗氧化活性,丁香中的总黄酮含量较高,含有槲皮素、山奈酚、鼠李素及苷类等黄酮类化合物,可以有效清除人体内自由基,具有潜在的开发价值。据此可对以水为溶剂时丁香活性成分提取的工艺参数进行优化探究,并定性定量测定不同提取工艺下总多酚与总黄酮的含量并进行抗氧化与降血糖活性研究,以期为丁香更进一步的药用与保健功能研究应用奠定基础。
- 要解决的问题
- 在以水为溶剂提取丁香干花细粉的基础上,通过单因素实验与正交实验考察不同料液比,浸提温度与时间,给定功率下超声时间对丁香水溶液中活性成分总黄酮与总多酚含量的影响,通过对比确定在实验室条件下丁香水提物的最佳提取工艺,为丁香抗氧化降血糖功能食品药品的开发提供依据。
- 通过DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基清除实验定量计算丁香水提物的自由基清除率并以此为参考评价其抗氧化活性。
- 通过与市面上常见的alpha;—葡萄糖苷酶抑制剂低聚糖阿卡波糖对葡萄糖苷酶活性的抑制效果进行对比来评价丁香水提物的降血糖活性。
- 可行性分析
首先,丁香中的活性成分多酚与黄酮具有一定的稳定性与水溶性,因此可以用水为溶剂浸提并在适宜的温度范围内加热辅助溶解。由于超声波具有空化效应,也可以在合适的功率条件下增加多酚与黄酮在水中的溶解度。
其次,多酚与黄酮化学结构上均有苯环与不饱和基团,故具有一定的紫外可见吸收,在预实验中,通过调节合适的料液比与温度时间,抽滤后所得到的滤液经过合理的稀释后可以将吸光度控制在紫外可见分光光度计所推荐的0.2至0.7范围内,相对误差较小,因此可以用吸光度的大小通过标准曲线来确定滤液中活性成分的含量,进而对工艺参数进行筛选评价与优化。
再次,DPPH自由基清除实验是常用的抗氧化活性评价实验,其操作过程简单,准确性高,可以定量计算自由基清除率,有很好的实操性与可信度。
最后,以阿卡波糖为对照,通过alpha;—葡萄糖苷酶的活性变化可以定量测评丁香水提物的降血糖活性。
- 研究方法和内容
首先,在参考文献资料[[6]]的基础上,对购买来的干燥药用丁香进行粉碎过筛,细粉保存在冰箱中,在实验室条件下,先进行单因素实验,在保证其他因素接近于文献报告记录的最佳条件的基础上,每次控制一个变量,分别考察不同料液比,不同浸提温度与时间以及不同超声时间下的总多酚与总黄酮含量。(由于实验条件有限,原计划考虑的另外两个因素不同超声温度与不同超声仪器功率无法进行)
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